Immune Cell Culture

Culture Medium


 
 
NK Cell Medium
 
Kohjin Bio
 

KBM 501

人類周邊血來源之NK細胞活化用無血清培養基,
內含製藥等級人類血清白蛋白、轉鐵蛋白、
重組人類胰島素和重組IL-2 (2814 IU/ml)。
 
KBM501

KBM 502

人類已活化之NK細胞擴增用無血清培養基,
內含製藥等級人類血清白蛋白、轉鐵蛋白、
重組人類胰島素和重組IL-2 (281 IU/ml)。 
KBM502

KBM 581

適用於人類周邊血來源之CIK細胞的誘導
活化無血清培養基,內含製藥等級人類血
清白蛋白、重組人類胰島素。使用時可添
加IL-2, IFN-r, anti-CD3抗體幫助體外誘導
PBMC生成CIK細胞。
 
 

KOHJIN BIO
KOHJIN BIO 總部位於日本東京,成立於1981年,擁有三十多年的細胞培養產品研發和生產經驗。KOHJIN BIO 生產工廠通過ISO13485認證,生產流程均遵循GMP規範,一直以來專注為市場提供技術領先、品質卓越的產品。

人類NK細胞活化用無血清培養基 KBM 501

  應用:

適用於人類周邊血來源NK cells的活化

  特點:

  • 培養基由注射等級溶劑和製藥等級高純度試劑組成
  • 此培養基不含人血清白蛋白(製藥等級)、人類轉鐵蛋白、重組人類胰島素、重組人類 IL-2 (2,814 IU/mL) 以外的蛋白質
  • 具備超強緩衝能力,有效控制溶液之pH值微幅變化
  • 含有Kanamycin Sulfate作為抗生素
  • 已登記美國FDA DMF原料藥主檔案

  使用範例:

  1. 培養開始時加入 5-10 % autoserum 或 autoplasma 
  2. 根據細胞增殖速度添加培養養基,擴大培養規模。過程中可以省略添加autoserum 或 autoplasma 
  3. 達到一定的規模以後,將培養基更換為含有較低IL-2濃度(281 IU/mL)的KBM 502 

Osmolality : 290 ± 15 mOsm/kg H2O (determined by freezing point depression osmometry)
pH : 7.2 ± 0.2 (determined using a glass electrode)
Sterilization : Negative (Membrane filtration)
Mycoplasma Test : Negative (PCR detection)
Endotoxin Test : Less than 0.3 EU/mL (Determined by Limulus amebocyte lysate assay) 
注意事項:本產品僅供研究使用,不適用於人或動物的治療用途。

  細胞培養範例:

KBM 501的性能評估
細胞:健康成人的周邊血單核球細胞
容器:已有anti-human-CD3 antibody固定的12-well plate
細胞因子:含有重組人類IL-12 (2,814 IU/mL)
血漿:在培養開始時加入1 %滅活的autoplamsa
增殖試驗:在37°C、5% CO2的環境下,從起始濃度27×104 cells/mL靜置培養開始,根據細胞的增殖情況,適量添加含有細胞因子的培養基進行擴增培養。在培養的第10日計算不被Trypan blue染色的細胞數。
分析:在培養的第10日,用流式細胞儀分析活化淋巴細胞的表面標記。並且使用TeraScan測量對腫瘤細胞株K562細胞的細胞毒性,TeraScan是為測量細胞毒性而開發的微量螢光計。






保存溫度:2-8°C      有效期限:製造後8個月
Product Name Product Code Size Packaging Additive
(rhIL-2)
HSA
(mg/ml)
h
Transferring
rh
Insulin
FDA
DMF
Specialized for
KBM 501 16025015 500 mL Bottle 2,814 IU/mL NK, cytotoxic T cells
 

人類已活化之NK細胞擴增用無血清培養基 KBM 502

  應用:

優化用於擴增經KBM 501預先活化的人類周邊血來源NK cells。為了有效防止污染風險,建議使用袋裝的KBM 502B,在培養袋內進行擴增培養。

  特點:

  • 培養基由注射等級溶劑和製藥等級高純度試劑組成
  • 此培養基不含人血清白蛋白(製藥等級)、人類轉鐵蛋白、重組人類胰島素、重組人類 IL-2 (281 IU/mL) 以外的蛋白質
  • 含有Kanamycin Sulfate作為抗生素
  • 已登記美國FDA DMF原料藥主檔案
  • 細胞培養袋採用透氣材料,使用日本藥典 (Japan Pharmacopoeia) 塑料醫療容器試驗方法驗證其安全和品質

  使用範例:

  1. NK cells 使用 KBM 501活化後,將培養基更換為含有較低IL-2濃度 (281 IU/mL) 的KBM 502,進行進一步擴增,也可將細胞加入KBM 502B,在袋內進行擴增培養
  2. 可依擴增情況加入autoserum 或 autoplasma,亦可不添加

Osmolality : 290 ± 15 mOsm/kg H2O (determined by freezing point depression osmometry)
pH : 7.2 ± 0.2 (determined using a glass electrode)
Sterilization : Negative (Membrane filtration)
Mycoplasma Test : Negative (PCR detection)
Endotoxin Test: Less than 0.3 EU/mL (Determined by Limulus amebocyte lysate assay)
注意事項:本產品僅供研究使用,不適用於人或動物的治療用途。

  參考文獻:

Crescenzo, Ramona, et al. "Convergent mutations and kinase fusions lead to oncogenic STAT3 activation in anaplastic large cell lymphoma." Cancer cell 27.4 (2015): 516-532.
Shimojima, Masaya, et al. "Emerin plays a crucial role in nuclear invagination and in the nuclear calcium transient." Scientific Reports 7 (2017).

保存溫度:2-8°C      有效期限:製造後8個月
Product Name Product Code Size Packaging Additive
(rhIL-2)
HSA
(mg/ml)
h
Transferring
rh
Insulin
FDA
DMF
Specialized for
KBM 502 16025020 1000 mL Bottle 281 IU/mL NK, cytotoxic T cells
KBM 502B 1602502B 1000 mL Bag 281 IU/mL NK, cytotoxic T cells
 

人類CIK細胞無血清培養基 KBM 581

  應用:

KBM 581 適用於人類周邊血淋巴細胞來源細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK cells)的誘導活化培養。IL-2、IFN-γ、 anti-CD3 抗體、和人類自體血清,對於體外誘導生成CIK細胞都是必須的。

  特點:

  • 培養基由注射等級溶劑和製藥等級高純度試劑組成
  • 此培養基不含人血清白蛋白(製藥等級)和重組人類胰島素以外的蛋白質
  • 具備超強緩衝能力,有效控制溶液之pH值微幅變化
  • 含有Kanamycin Sulfate作為抗生素

  使用範例:

  1. 添加 IFN-γ 至 KBM 581中,建議IFN-γ最終濃度為 1000 IU/mL
  2. 加入人類自體血清至 1. 製備的培養基中,建議最終濃度為10 %
  3. 計數分選後或解凍的單核球細胞數,以 0.5〜2×106 cells/ml 濃度接種細胞,並在37℃,5 % CO2恆溫培養箱中靜置培養
  4. 培養開始第1天,添加 IFN-γ (至最終濃度 300 IU/mL)和 anti-CD3抗體(至最終濃度 50 ng/mL)至上述製備的培養基中
  5. 從第4天開始到細胞回收日期,中間以一定間隔、一定比例添加含有IFN-γ的新鮮培養基(如果必要,以T-flasks和細胞培養袋擴大培養規模。)添加新鮮培養基時,稀釋上述的細胞懸浮液至濃度為 1~2×106 cells/ml。靜置培養14-21天

  參考文獻:

2002 Blackwell Science Ltd, British Journal of Haematology 116:78-86​

  細胞培養範例:

培養方式
細胞:健康成人的周邊血單核球細胞
容器:24-well plate
增值試驗:“Growth curves of lymphocytes” 圖顯示培養的14日期間內,不被Trypan blue染色的活細胞數
流氏細胞儀分析:培養第14日用流式細胞儀檢測各種細胞表面標記

使用KBM 581培養14天所得到的CIK細胞數量明顯的比其他培養基所得到的細胞數量高。 表面標記物分析顯示,KBM 581培養的CIK細胞群(CD3+/CD56+ & CD3+/CD56-)分別為13.0 %和2.3 %,相對於其他培養基所得到的比例高。


保存溫度:2-8°C      有效期限:製造後8個月

Product Name

Product Code

Size

Packaging

Additive
(rhIL-2)

HSA
(mg/ml)

h
Transferring

rh
Insulin

FDA
DMF

Specialized for

KBM 581

16025810

1000 mL

Bottle

w/o

 

 

CIK cells