Cell-Based Assay

Cell Hypoxia


2019 年諾貝爾生理或醫學獎頒發給 William G. Kaelin Jr.、Sir Peter J. Ratcliffe 和 Gregg L. Semenza 等三人,他們的研究發現並闡述了在缺氧的情況下,細胞如何偵測到並且調整基因活性來適應。

氧氣濃度高時會自然在 HIF-1α 上形成氫氧基等後續修飾, VHL 蛋白會辨認這樣的修飾並加速 HIF-1α 的降解。氧氣濃度降低會改變 HIF-1α 上的修飾,而避免 VHL 對 HIF-1α 分解的調控,當 HIF-1α 在細胞核中累積到足夠的濃度時,就會啟動細胞一連串的基因活化 。|圖片來源 nobelprize.org

由於當時有了這樣重大的發現,後續越來越多的研究結果顯示,細胞感受氧氣濃度的反應牽涉的生理機制相當廣泛,例如肌肉進行激烈的運動時,氧氣濃度的變化會引發新的血管以及紅血球的產生,免疫系統的調控也受氧氣濃度的偵測影響,還包括新生兒的發育、腎臟細胞生產紅血球生成素 (EPO) 以及癌細胞轉移等諸多細胞生理現象。
 

新型態的細胞缺氧觀察工具 - Live Cell Image

過去研究細胞缺氧的方法大多是利用西方點墨法觀測細胞中 HIF-1α 含量,或者是需要固定細胞的Pimonidazole Hydrochlorid,相當費時費工也不能即時的觀測細胞缺氧的狀況,Merck Millpore 的  hypoxia dye 將為細胞缺氧的實驗提供新型態的觀測方式,大大的靈活實驗設計。
 

  SCT033 BioTracker 520 Green Hypoxia Dye  
包裝 : 5x25μg
螢光波長 : Ab: 498 nm / Em: 520 nm
原理 : BioTracker 520 Green Hypoxia Dye tracker 在低氧環境下,
能與還原酶反應轉變成可激發螢光之分子結構。
BioTracker 520 GreenHypoxia Dye tracker 對於低氧環境的靈敏性,
比 pimonidazole高出許多,在 5% 氧氣濃度下,即可以呈現高強度螢光。
Tracker 反應過程無需固定 (fixation)。
利用流式細胞儀來分析 Biotracker 520 的結果

 


A549 細胞株螢光強度的變化,反應出不同氧氣濃度條件。

 

有較高的靈敏度