免疫細胞治療已證明在多種癌症中具有臨床療效和巨大的潛力。因此深入研究腫瘤浸潤淋巴細胞(tumor-infiltrating leukocytes, TILs)的組成以及TILs對腫瘤微環境的影響，是至關重要的。Miltenyi Biotec提供高品質的工具以及完整的工作流程，來支持您分析TILs的每一步，幫助您從有限的腫瘤材料中獲得關鍵的研究數據。

工作流程概述
最佳的組織保存方式
 

腫瘤樣本通常是由合作單位進行採集，再運送至實驗室做處理與分析。MACS® Tissue Storage Solution用於儲存新鮮的器官和組織樣本，不會引起細胞凋亡或活化。
腫瘤樣本在4°C條件下最多可保存48小時   最佳的細胞活性   保留完整TILs細胞組成

使用MACS® Tissue Storage Solution儲存新鮮的CT26腫瘤組織長達48小時，不會影響細胞活性或引起活化/凋亡等不良反應。透過流式細胞儀分析，完整的保留了TILs的細胞組成。

超高通量的圖像分析系統

腫瘤微環境是非常複雜的，由高度可變動的細胞組成以及多達數千種蛋白質參與在細胞轉移的過程，因此對腫瘤組織的深入探討需要分析大量的參數。當前的技術只能提供有限的數據，無法進行如此複雜且高通量的分析過程。

Miltenyi Biotec提供超高通量的螢光影像分析系統，成功地克服這些限制。使用創新的MICS技術(MACSima™ Imaging Cyclic Staining)，能夠循環的進行染色－成像－消除的過程，實現在單個樣品中進行多達數百種蛋白質或抗原標記的分析。 01 樣品使用螢光抗體進行染色 02 獲取樣品區域的螢光圖像 03 清除螢光訊號，自動重啟下一輪進程

 

	同時呈現五種不同的蛋白質標記(DAPI – blue; CD45 – yellow; EPCAM – green; CD90 – red; CD31 – magenta)
	在colon carcinoma切片組織中定義不同細胞的位置
單個colon carcinoma切片組織，可同時分析75種不同的蛋白質標記。透過Qi組織圖像分析軟體，您可以透過細胞核和與細胞輪廓來定義單顆細胞的位置與邊界，透過提取每一種標記物的細胞特異性強度，再根據細胞的分佈來辨識數種不同的細胞，來確認滲入的細胞與腫瘤位置。

快速、溫和且有效率的組織解離方案
 
Miltenyi Biotec提供完整的組織解離流程，針對原發性腫瘤、異種移植(xenograft)、TILs進行優化，讓您從腫瘤樣本中快速輕鬆獲得高質量的單細胞懸浮液。Tumor dissociation Kit具有高純度的酵素，最大限度的保留細胞標記 (超過200種的epitope測試)，並且完整的保存細胞功能性。

建議搭配 130-096-427 gentleMACS™ Octo Dissociator with Heaters

可分別或一次處理最多8個不同的樣本 具有加熱至37℃的功能 內建45個半自動的實驗步驟與22個全自動(含加熱)的實驗步驟，節省時間與人力 提供標準化的實驗流程，數據再現性高 多樣化的程式可應用於任何組織

 

B16-F10小鼠腫瘤使用MACS組織解離方案，相較於一般酵素/手動解離方法具有高回收率的CD8+ TILs	TILs與腫瘤細胞的共培養，透過IFN-γ的分泌來檢測抗原特異性T細胞的功能性。

磁性細胞分選
 

Miltenyi Biotec專為複雜且多變的腫瘤微環境所開發設計的TIL microbead，提高您細胞的分選效率，能夠從腫瘤組織中分離高純度的TIL細胞群，並完全兼容下游實驗，例如: 流式細胞儀、細胞培養。   獲得高純度、高活性細胞   提高分析的準確性   使用流式細胞儀的時間更少 B16-F10小鼠腫瘤單細胞懸浮液使用CD45(TIL), CD4(TIL), CD8(TIL), CD4/CD8(TIL) microbead進行分選，能夠有效率的富集目標細胞群(>500倍)，同時超過80%的細胞純度。

 

為了更靈活的分析人類TIL，推薦使用REAlease® MicroBead Kits，能夠在分選後去除microbead與抗體標記，以便於再做第二次的microbead分選實驗。可應用於Treg cells, memory T cells, TCRγ/δ+ T cells細胞分析 左圖:  (A, B)人類卵巢腫瘤單細胞懸浮液使用REAlease CD45 (TIL)，能夠有效率的分選出microbead-free/label-free的目標細胞 (C) 利用REAlease microbead從結腸癌單細胞懸浮液中分選出純度超過80%的T細胞族群 右圖: 創新的REAlease細胞分選的工作流程 更詳細的REAlease microbead資訊，請參考: 細胞表面的完全解放

 
產品選擇

Product	Order No.
Tissue storage
MACSR Tissue Storage Solution	130-100-008
Imaging
MACSima™ Imaging System	130-121-164
Tissue dissociation
gentleMACS™ Octo Dissociatior with Heaters	130-096-427
Tumor Dissociation Kit, mouse	130-096-730
Tumor Dissociation Kit, human	130-095-929
Cell separation
autoMACSR Pro Separator - Starter Kit	130-092-545
MultiMACS™ Cell24 Separator Plus	130-098-637
MACS Technology
CD45 (TIL) MicroBeads, mouse	130-110-618
CD4 (TIL) MicroBeads, mouse	130-116-475
CD8 (TIL) MicroBeads, mouse	130-116-478
CD4/CD8 (TIL) MicroBeads, mouse	130-116-480
CD45 (TIL) MicroBeads, human	130-118-780
REAleaseR Technology
REAlease CD45 (TIL) MicroBead Kit, human	130-121-563
REAlease CD3 (TIL) MicroBead Kit, human	130-121-562
REAlease CD4 (TIL) MicroBead Kit, human	130-121-559
REAlease CD8 (TIL) MicroBead Kit, human	130-121-560
REAlease CD4/CD8 (TIL) MicroBead Kit, human	130-121-561
Cell sorting
MACSQuantR TytoR Cell Sorter	130-103-931
Flow cytometry analysis
MACSQuant Analyzer 10	130-096-343
MACSQuant Analyzer 16	130-109-803