Exosome

外泌體分離與分析，還有比MACS Technology更簡單的嗎？
外泌體是由多種類型的細胞，如T、B、NK細胞、以及腫瘤細胞等分泌的一種囊泡狀結構，體積非常小，直徑在30-100 nm之間，又稱細胞外囊泡(Extracellular Vesicles, EVs)。外泌體常攜帶其起源細胞(donor cell)的多種生物分子，包括蛋白質、脂類和核酸，因此，此內組成反應了起源細胞的種類和狀態，外泌體自起源細胞釋放後由受體細胞(recepient cell)吸收其內的生物分子，外泌體參與了多種生物學過程，包括免疫監控、血液凝固、神經傳遞、幹細胞維護和組織修復等。
 
Exosome isolation kit, human or mouse
快速，高純度，高產量 !
Exosome為不同細胞纇型 (例如: T細胞、B細胞、樹突細胞等)所釋放的小囊泡，辦演著多種重要的生物功能，例如: 免疫、凝血、神經通訊、幹細胞維護與組織修復等功能。這個產品式基於MACS的磁性分選技術，搭配專用的µ column與µ​MACS separator來分離出細胞培養上清液、血清、尿液或腹水等樣本的Exosome，具有快速、高純度、高產量等優勢。
Exosome isolation kit利用MicroBeads識別外泌體表面常見的四跨膜蛋白CD9、CD63和CD81，簡單磁性分離三步驟，1.5小時內完成外泌體純化。

特點

• 不再需要密度梯度離心！
• 根據不同的表面抗原CD9、CD63、CD81或是一次使用三種抗原組合做exosome分選

起始樣本 ： 細胞培養上清液、血漿、尿液、或腹水
樣本起始體積 ： 0.5 ~ 2 mL
分選策略 ： Positive Selection, 手動

實驗重點步驟

 

使用CD63, CD9, 和CD81 MicroBeads分離NK細胞EVs和血小板EVs Western Blot分析NK細胞EVs(左)，NK細胞和血小板EVs混合物(中)， 和血小板EVs(右)。 CD63-MB, CD9-MB, CD81-MB：用CD63、CD9或CD81 MicroBeads 分離的EVs (25 μg NK細胞EVs， 12.5 μg NK細胞EVs 和25 μg 血小板EVs 的混合物，以及50 μg血小板EVs 作為磁性分選的起始材料。

CD29, CD81, CD9：檢測用抗體
Ctrl組：1.7 μg NK 細胞 EVs (左)，0.8 μg NK細胞 EVs和1.7 μg 血小板EVs的混合物 (中)，3.3 μg血小板EVs (右)。

MACSPlex Exosome Kit, human
簡單、快速的分析外泌體表面37種表面抗原
Exosomes由於體積非常小難以使用標準的流式細胞儀做分析。分析外泌體蛋白的傳統方法有western blot、質譜分析、掃描電鏡和流式分析，傳統方法不僅費時費力，而且容易出現技術問題，像是離心管破裂和密度梯度解離等造成外泌體樣本的損失。MACSPlex技術是透過帶有專一性抗體且具有不同螢光強度的Capture antibody Beads去區分不同類型的Exosomes，進一步利用Detection Antibody去偵測Exosome的表現量，簡單地利用流式細胞儀分析高達37種exosome的表面抗原。

產品特點

• 完整全面的設計 - 快速簡便地分析EVs高達37種不同的表面抗原
• 彈性化 - 可添加其他抗體用於多參數分析
• 快速模式 - 結合MACSQuant^®流式細胞儀上的快速模式(Express Mode)進行自動採集和分析

The MACSPlex Exosome Kit 是開發設計用於同時偵測exosomes上37種不同的表面抗原，加上兩種isotype control beads。

基於MACSPlex bead-based assay的分析技術，原理如下：​

 

使用MACSPlex Exosome Kit和流式細胞儀對外泌體進行分析。 分析實例顯示(A)根據beads大小進行gating，(B) 區分不同標記的beads群，和(C) 測量單個beads群的訊號強度。

 

利用MACSPlex Exosome Kit對黑色素瘤細胞和結腸癌細胞中的外泌體進行分析 此實驗結果顯示了，不同腫瘤來源的外泌體表達的抗原標記也是明顯不同的，因此可以透過分析表面標記物來識別源自於何種癌細胞。

 

Product	Capacity/Components/Content	Order No.
Exosome Isolation Kit CD9, human	for 20 isolations	130-110-913
Exosome Starting Kit CD9, human	Exosome Isolation Kit CD9, human (130-110-913) MACS MultiStand (130-042-303) µMACS Separator (130-042-602)	130-111-573
Exosome Isolation Kit CD63, human	for 20 isolations	130-110-918
Exosome Starting Kit CD63, human	Exosome Isolation Kit CD63, human (130-110-918) MACS MultiStand (130-042-303) µMACS Separator (130-042-602)	130-111-576
Exosome Isolation Kit CD81, human	for 20 isolations	130-110-914
Exosome Starting Kit CD81, huma	Exosome Isolation Kit CD81, human (130-110-914) MACS MultiStand (130-042-303) µMACS Separator (130-042-602)	130-111-575
Exosome Isolation Kit Pan, human	for 20 isolations	130-110-912
Exosome Starting Kit Pan, human	Exosome Isolation Kit Pan, human (130-110-912) MACS MultiStand (130-042-303) µMACS Separator (130-042-602)	130-111-572
Exosome Isolation Kit CD9, mouse	for 20 isolations	130-117-042
Exosome Isolation Kit CD63, mouse	for 20 isolations	130-117-041
Exosome Isolation Kit CD81, mouse	for 20 isolations	130-117-040
Exosome Isolation Kit Pan, mouse	for 20 isolations	130-117-039
MACSPlex Exosome Kit, human	for up to 96 tests	130-108-813